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脲酶(UE)測試盒微量法

簡要描述:脲酶(UE)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:馬鈴薯葡萄糖水 英文名稱:Potato Dextrose Water 產(chǎn)品規(guī)格:250g 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 英文名稱:Intergrated Potato Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 麥芽汁培養(yǎng)基 英文名稱:Malt Extract Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g YPD液體培養(yǎng)基 英文名稱:YPD Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:1097

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:脲酶(UE)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6508

產(chǎn)品分類:氮代謝系列
商品介紹:

測定意義:

UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE活性與有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。

測定原理:

利用靛酚藍(lán)比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

50T 對蝦白斑病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1g ONPG 干粉 ONPG,Powder -20℃保存

2 ug RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 微量樣品盒 Tiny Sample DNA-RNAOUT 4℃保存

2 ug pET-37b(+) pET-37b(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

UBA培養(yǎng)基 UBA Medium 250g

1瓶 ACHN細(xì)胞株 ACHN 低溫運(yùn)輸和保存

2mL 鏈霉親和素磁珠 Magnetic beads,Streptavidin 4℃密閉、豎直保存

200U Bsu DNA 聚合,大片段 Bsu DNA Polymerase,Large Fragment -20℃保存

250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.5   MOPS Buffer,1.0M,pH7.5   常溫保存

100uL 玉米Zein基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

脲酶(UE)測試盒微量法UHRF1  核蛋白95抗體 規(guī)格: 0.2ml

C3orf70  3號染色體開放閱讀框70抗體 規(guī)格: 0.2ml

BMP4  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

GPKOW  G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

MMP-12  基質(zhì)金屬蛋白-12抗體 規(guī)格: 0.1ml

SRGN/Chondroitin sulfate proteoglycan core protein  多糖核心蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

RNF165  環(huán)指蛋白165抗體 規(guī)格: 0.2mlT4/L-Thyroxine  甲狀素T4抗體 0.2ml

Amylin  糖尿相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體 規(guī)格: 0.1ml5-HTR1B  5-羥色胺受體1B抗體 0.1ml

Viperin/RSAD2  毒抑制蛋白Viperin抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

THRSP  甲狀激素反應(yīng)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGlutaredoxin 1  谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlCCDC135  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體 規(guī)格: 0.2ml

Tubulin alpha 6/TUBA1C  微管相關(guān)蛋白α6抗體 規(guī)格: 0.1mlVEGF  管內(nèi)皮生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

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