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轉(zhuǎn)氫酶1測試盒微量法

簡要描述:轉(zhuǎn)氫酶1測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*20支 梭菌屬測定用培養(yǎng)基 英文名稱:Clostridium Test Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 硫酸慶大 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5支 液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20ml*10支

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:1275

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

轉(zhuǎn)氫酶1測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6565

商品介紹:

測定意義:

TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復(fù)合體六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH。

測定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計算TH-2活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

腸球菌、溶血性鏈球菌和糞鏈球菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基  

50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(λDNA/EcoR I+ Hind III) DNAMETER(3) 4℃保存

2 ug pGEX-4T- 2 pGEX-4T- 2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

PPLO瓊脂 PPLO Agar 250g

1瓶 G401細(xì)胞株 G401 低溫運(yùn)輸和保存

225ml布氏肉湯均質(zhì)袋 Brucella Broth 10個/包

2000 U 限制性內(nèi)切HindIII Restriction Endonuclease -20℃保存

50mL Prehybridization Solutions in SSPE  Prehybridization Solutions in SSPE  常溫保存

10mL 溶液,50mg/mL Tetracycline HCl Solution -20℃保存

2 ug pQE-32 pQE-32 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

250mL 非凍型組織RNA保存液 RNALOCKER 常溫

轉(zhuǎn)氫酶1測試盒微量法PILR beta  細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-6R Beta/CD130/gp130  白細(xì)胞介素6受體β抗體IL-6Rβ 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

BAT5  白細(xì)胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

MEOX 2  間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)  磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 規(guī)格: 0.1ml

BCSC1  抑蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlComplement C3 beta chain  補(bǔ)體C3b抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-JunB(Ser79)  磷酸化活化蛋白激B抗體 規(guī)格: 0.1mlGDPD5  甘油磷酸二酯磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體 規(guī)格: 0.2ml

RPS6KA1/p90RSK/RSK1  絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlTIP47/M6PRBP1  脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體 規(guī)格: 0.2ml

CDC2L5  細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激5抗體 規(guī)格: 0.2mlPolyprotein(Hepatitis G Virus)  庚型毒多聚蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

IGF2BP3/IMP3  胰島素樣生因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlCSFV Polyprotein  豬瘟毒抗體 規(guī)格: 0.1ml

EDG3  內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 規(guī)格: 0.2mlC16orf57  16號染色體開放閱讀框57抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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