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3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法

簡要描述:3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Getrimide Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD) 英文名稱:Yeast Peptone Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱:Lactose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基(EM

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:888

詳細介紹

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6616

產(chǎn)品分類:糖酵解系列
商品介紹:

測定意義:

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,廣泛存在于動植物和微生物體內(nèi),催化13-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>3-磷酸甘油酸,產(chǎn)生1分子ATP,具有影響DNA復(fù)制和修補及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能,廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

改良馬丁培養(yǎng)基 Martin Broth,Modified 250g

1瓶 BV2細胞株 BV2 低溫運輸和保存

100mL RNase-free SDS溶液,10%  常溫

250U KOD DNA聚合 KOD DNA Polymerase -20℃保存

100mL PEG 3350 Solution,50%   PEG 3350 Solution,50%   常溫保存

0.1mL×10 DH5α化學(xué)感受態(tài)細胞 DH5α Competent Cell -80℃保存

2 ug pNI_v2 pNI_v2 低溫運輸,-20℃保存

MS培養(yǎng)基(含瓊脂,不含蔗糖)  250g

1瓶 THLE-3細胞株 THLE-3 低溫運輸和保存

賴鐵瓊脂(LIA) Lysine Iron Agar 250g

1g 熒光增白劑 28 Fluorescent Brightener 28  室溫干燥保存

3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法EphA2/Eph receptor A2  內(nèi)皮細胞受體蛋白酪激抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fetuin beta  胎球蛋白B抗體(Fetuin β) 規(guī)格: 0.2ml

PBEF1(CT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) 規(guī)格: 0.1ml

PDHA1/PDH-E1α  丙酮酸脫α1抗體 規(guī)格: 0.2ml

PRB2/p130  視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白p130抗體 規(guī)格: 0.1ml

PRKCQ/PKC theta  蛋白激C theta抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-PRKCZ(Thr500)  磷酸化蛋白激C(T500)抗體 規(guī)格: 0.2ml

PRRSV-GP5  豬藍耳毒GP5蛋白抗體 規(guī)格: 1ml

Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Smad2(Thr220)  磷酸化細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 規(guī)格: 0.1ml

UBOX5/RNF37  泛素結(jié)合7相互作用蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

SLC26A4  鈉碘單獨轉(zhuǎn)運蛋白SLC26A4抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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