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中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒微量法

簡要描述:中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:吡哆醇Y培養(yǎng)基 英文名稱:Pyridoxine Y medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基 英文名稱:Pseudomonas CFC Selective Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 可溶性淀粉培養(yǎng)基 英文名稱:Soluble Starch Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g AK瓊脂(2號(hào)) 英文名稱:AK Agar(No.2)

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-26
  • 訪  問  量:691

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號(hào)

中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6711

商品介紹:

測定意義:

蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。                          

NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。

測定原理:

NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計(jì)算NI活性

自備用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

50T 流行性出血熱漢坦病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

0.1mg 山羊抗小鼠IgG,熒光素488標(biāo)記 Goat Anti-Mouse IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

2 ug pBIND pBIND 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10mL TE緩沖液,PH8.5  

2 ug pFastBac1 pFastBac1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(2015藥典) Sabouraud Dextrose Broth 250g

1瓶 C3H/10T1/2,Clone 8細(xì)胞株 C3H/10T1/2,Clone 8 低溫運(yùn)輸和保存

大腸菌群顯色培養(yǎng)基 Coliform Chromogenic Medium 1000(ML)

50U T4 DNA 聚合  T4 DNA Polymerase -20℃保存

500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4   Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4   常溫保存

0.1mL×10 BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 BL21 (DE3) Competent Cell -80℃保存

中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒微量法Rabbit anti-human IgM whole serum  兔抗人IgM抗清 規(guī)格: 1ml

Lingo-1  Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Adenovirus 5 E1A  毒早期E1A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml

Peptide YY/PYY  酪酪肽抗體 規(guī)格: 0.2ml

HIG1/HIGD1A  缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ART4/CD297  二磷酸苷核糖基轉(zhuǎn)移4抗體 規(guī)格: 0.2ml

VEGF  管內(nèi)皮生因子抗體 0.1ml

CQ028  多基因下調(diào)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

APE/Girdin  肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml

beta-Amyloid(31-35)  β淀粉樣肽(31-35)抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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