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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  細(xì)胞  >  細(xì)胞系  >  5×106cells/瓶5637(人膀胱癌細(xì)胞)

5637(人膀胱癌細(xì)胞)

簡要描述:5637(人膀胱癌細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

  • 產(chǎn)品型號:5×106cells/瓶
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-17
  • 訪  問  量:2232

詳細(xì)介紹

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

產(chǎn)品名稱 5637(人膀胱癌細(xì)胞)
規(guī)格 5×106cells/瓶
貨號 BK-X87411

產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

培養(yǎng):
1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺內(nèi),固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中,脾臟置于篩網(wǎng)上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨,同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,取樣計數(shù)。
7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養(yǎng)瓶上。
實驗事項:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

CD84 AIMP2抗體
CD7 乙酰膽堿酶抗體
TNFRSF10D 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
KLK13 防御素α1/3抗體
PIGR ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
PDGFRA 植物延長蛋白
IL3RA A-Raf抗體
CTLA4 磷酸化A-Raf抗體
MSR1 紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體
CD14 雄激素結(jié)合蛋白抗體
HA 肝再生增強(qiáng)因子抗體
SERPING1 APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體
METTL1 甲胎蛋白單克隆抗體
SELE 甲胎蛋白單克隆抗體
CR2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體
CD55 芳香烴受體抗體
CD8A 吸引素抗體
ICAM3 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體
CD3D 蛋白激酶B2
IL18R1 血管生成素2抗體
C1S 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體
VTN 腺苷A2A受體抗體
ECM1 蛋白激酶A錨定蛋白95抗體
TF 頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體
HA 去整合素樣金屬蛋白酶8抗體
HA 芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白3抗體
GAG-P24 ACN9蛋白抗體
TNFRSF1A 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體
ENG 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
IL1R2 腺苷酸激酶抗體
IL17RA α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1
APOH 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體
CD40 肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
CD36 ATP結(jié)合蛋白家族7抗體
KLK11 ASCL2蛋白抗體
CD97 磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
NTRK3 磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
HA 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

自噬相關(guān)蛋白4A抗體 IGFBP-4 ELISA Kit
載脂蛋白A4抗體 IGFBP-3 ELISA Kit
12脂氧合酶抗體 IGFBP2 ELISA Kit
血管緊張素III抗體 IGFBP-1 ELISA Kit
腺苷酸環(huán)化酶3抗體 IGFBP-3 ELISA Kit
血管動蛋白抗體 IGFBP-2 ELISA Kit
腺病毒早期E1A蛋白抗體 IGFBP-1 ELISA Kit
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 IGF-2R ELISA Kit
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 IGF-2 ELISA Kit
磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 IGF2BP2 ELISA Kit
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 IGF-1 ELISA Kit
胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體 IRS-2 ELISA Kit
ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 IRS1 ELISA Kit
花生四烯酸15脂氧合酶1抗體 ISR-β ELISA Kit
乳腺癌增強(qiáng)蛋白2抗體 INSRA ELISA Kit
α1微球蛋白抗體 IGF-Ⅱ ELISA Kit
α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 IGF-Ⅰ ELISA Kit
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體 Anti-Ins ELISA Kit
AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 IDE ELISA Kit
致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 INS ELISA Kit
腺苷脫氨酶抗體 IAPP ELISA Kit
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體 TAP ELISA Kit
ATRNL1蛋白抗體 Try-Ⅱ ELISA Kit
AFP4a蛋白抗體 trypsin ELISA Kit
鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 CPAF ELISA Kit
鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體 HbCO ELISA Kit
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 NO ELISA Kit
早老素穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌酶組件蛋白APH1抗體 NOS ELISA Kit
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 NOS ELISA Kit
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 NO ELISA Kit
ASH1L蛋白抗體 FOLR1 ELISA Kit
α2C-AR腎上腺素能受體抗體 FOLR ELISA Kit
中心體蛋白AZI1抗體 FA ELISA Kit
5637(人膀胱癌細(xì)胞)α蛋白激酶3抗體 GSSG ELISA Kit
表皮型脂氧合酶3抗體 OxLDL ELISA Kit
錨蛋白重復(fù)域28抗體 Ox-HDL ELISA Kit
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線。

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